Přejít k hlavnímu obsahu

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

PCR s využitím interkalačních barviv pro rozlišení živých a mrtvých buněk arkobakterů v biofilmu
Autoři: Hrušková Lucie | Moťková Petra | Vytřasová Jarmila
Rok: 2014
Druh publikace: ostatní - přednáška nebo poster
Strana od-do: nestránkováno
Tituly:
Jazyk Název Abstrakt Klíčová slova
cze PCR s využitím interkalačních barviv pro rozlišení živých a mrtvých buněk arkobakterů v biofilmu Mikroorganismy vázané k povrchu, který je ve styku s potravinami, představují potenciální nebezpečí, proto je důležité tyto mikroby detekovat. V dnešní době jsou široce využívány metody molekulárně-biologické založené na PCR. Tyto metody mají celou řadu výhod, ale samozřejmě i jisté nevýhody. V potravinách i v životním prostředí se vyskytují jednotlivé druhy bakterií v malém zastoupení. Dále mohou vzorky obsahovat inhibitory PCR, které mohou mít za následek falešně negativní výsledky, což vyžaduje zavedení dodatečných purifikačních postupů. Pomocí těchto metod lze s využitím interkalačních barviv stanovit i životaschopnost buněk, například právě v bakteriálním biofilmu. EMA (ethidium monoazid) a PMA (propidium monoazid) jsou interkalační barviva, která mají schopnost proniknout do mrtvých buněk a kovalentně se vázat na DNA, čímž snižují PCR signál pocházející z mrtvých buněk a naopak signál z buněk živých je zesílen. V kombinaci s kvantitativní PCR lze takto sledovat například účinnost desinfekčních prostředků aj. Kvantitativní PCR je jedna z nejvíce využívaných metod pro přímou detekci a kvantifikaci patogenů v potravinách, životním prostředí a klinických vzorcích. Arcobacter spp; biofilm; ethidium monoazid; propidium monoazid