Publikace detail

Benzoyl chloride derivatization improves selectivity and sensitivity of lipidomic quantitation in human serum of pancreatic cancer patients using RP-UHPLC/MS/MS

Rok: 2025

Druh publikace: článek v odborném periodiku

Název zdroje: Analytical and Bioanalytical Chemistry

Strana od-do: neuveden

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Derivatizace benzoylchloridem zlepšuje selektivitu a citlivost kvantitativní lipidomické analýzy v lidském séru pacientů s rakovinou slinivky pomocí RP-UHPLC/MS/MS.	Chemická derivatizace je účinná strategie pro zlepšení chromatografického chování a hmotnostně spektrometrické citlivosti lipidů, které hrají zásadní roli v buněčných procesech a mají vysoký potenciál v oblasti výzkumu nádorových biomarkerů. V této studii popisujeme cílenou a validovanou metodu, která kombinuje derivatizaci benzoylchloridem s reverzní fázovou ultravýkonnou kapalinovou chromatografií spojenou s tandemovou hmotnostní spektrometrií (RP-UHPLC/MS/MS) pro kvantitativní analýzu lidského sérového lipidomu. Celkem bylo identifikováno 450 lipidových druhů z 19 lipidových podtříd na základě kombinace přechodů vícenásobného reakčního monitorování (MRM), retenčních závislostí, ředicích řad a derivatizačních značek. Vyvinutá metodika zvyšuje citlivost pro většinu zkoumaných tříd lipidů ve srovnání s konvenčními metodami, přičemž největší zlepšení bylo zaznamenáno u monoacylglycerolů, diacylglycerolů, sfingoidních bází a volných sterolů. Přesnost metody byla potvrzena pomocí referenčního materiálu NIST SRM 1950, protože zjištěné koncentrace odpovídaly konsenzuálním hodnotám z mezinárodních srovnávacích testů. Lipidomické profilování klinických vzorků odhalilo významnou deregulaci metabolismu lipidů u pacientů s rakovinou slinivky v porovnání se zdravými kontrolami. Klíčovými zjištěními bylo zvýšení hladin většiny monoacylglycerolů a sfingosinu a výrazné snížení hladin sfingolipidů s velmi dlouhými nasycenými N-acylovými řetězci a fosfolipidů obsahujících mastné kyseliny 18:2 a 20:4. Tento cílený přístup je v souladu s trendy pozorovanými v jiných studiích, přičemž zároveň přináší nová zjištění a podrobnější strukturální vhled do metabolických změn u rakoviny slinivky.	Derivatizace; Lipidomická kvantifikace; Kapalinová chromatografie; Hmotnostní spektrometrie; Lidské sérum; Rakovina slinivky břišní
eng	Benzoyl chloride derivatization improves selectivity and sensitivity of lipidomic quantitation in human serum of pancreatic cancer patients using RP-UHPLC/MS/MS	Chemical derivatization is a powerful strategy for enhancing the chromatographic behavior and mass spectrometric sensitivity of lipids, which play an essential role in cellular processes and show high potential in cancer biomarker research. In this study, we describe a targeted and validated method that combines benzoyl chloride derivatization with reversed-phase ultrahigh-performance liquid chromatography tandem mass spectrometry (RP-UHPLC/MS/MS) for the quantitative analysis of the human serum lipidome. In total, 450 lipid species from 19 lipid subclasses were identified based on a combination of multiple reaction monitoring transitions, retention dependencies, dilution series, and derivatization tags. The developed methodology increases the sensitivity for most investigated lipid classes in comparison to conventional methods, but the highest improvement was observed for monoacylglycerols, diacylglycerols, sphingoid bases, and free sterols. The method’s accuracy was confirmed using NIST SRM 1950, as the determined concentrations were in agreement with the consensus values from ring trials. Lipidomic profiling of clinical samples revealed a significant dysregulation of lipid metabolism in pancreatic cancer patients compared to healthy controls. Key findings included the upregulation of most monoacylglycerols and sphingosine, and a pronounced downregulation of sphingolipids with very long saturated N-acyl chains and phospholipids containing fatty acyl compositions 18:2 and 20:4. This targeted approach is consistent with the trends previously seen with other methods and also provides new findings and more detailed structural insights into metabolic alterations in pancreatic cancer.	Derivatization; Lipidomic quantitation; Liquid chromatography; Mass spectrometry; Human serum; Pancreatic cancer

Vyhledávání

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte