Publikace detail

Controlled proteolysis of normal and pathological prion protein in a microfluidic chip

Rok: 2008

Druh publikace: článek v odborném periodiku

Název zdroje: Lab On a Chip

Název nakladatele: Royal Society of Chemistry

Místo vydání: Cambridge

Strana od-do: 294-301

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Kontrolovaná proteolýza fyziologického a patologického prionového proteinu v mikročipovém zařízení.	Proteináza K byla imobilizovanána na magnetický nosič a ten byl aplikován do kanálku mikrofluidního zařízení. Mikročip byl použit ke štěpení fyziologického a patologického prionového proteinu. Další analýzou (Western blot) bylo potvrzeno, že obě formy lze snadno odlišit.
eng	Controlled proteolysis of normal and pathological prion protein in a microfluidic chip	A microreactor for proteinase K (PK)-mediated protein digestion was developed as a step towards the elaboration of a fully integrated microdevice for the detection of pathological prion protein (PrP). PK-grafted magnetic beads were immobilized inside a polydimethylsiloxane (PDMS) microchannel using a longitudinal magnetic field parallel to the flow direction and a magnetic field gradient, thereby forming a matrix for enzymatic digestion. This self-organization provided uniform pore sizes, a low flow resistance and a strong reaction efficiency due to a very thin diffusion layer. The microreactor?s performance was first evaluated using a model substrate, succinyl-ala-ala-ala-paranitroanilide (SAAAP). Reaction kinetics were typically accelerated a hundred-fold as compared to conventional batch reactions. Reproducibility was around 98% for on-chip experiments. This microsystem was then applied to the digestion of prion protein from brain tissues. Controlled proteolysis could be obtained by varying the on-chip flow rate, while a complete proteolysis of normal protein was achieved in only three minutes. Extracts from normal and pathological brain homogenates were finally compared and strong discrimination between normal and pathological samples was demonstrated.	Proteinase K, Prion protein, microfluidic device

Search

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte