Publikace detail

Laboratorní průkaz prionových chorob - limitovaná proteolýza prionového proteinu PrPc.

Autoři: Slováková Marcela | Bílková Zuzana | Peyrin Jean-Michel | Viovy Jean-Louis

Rok: 2008

Druh publikace: článek ve sborníku

Název zdroje: Alergie

Název nakladatele: Tigis, spol. s r.o.

Místo vydání: Praha

Strana od-do: 117

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Laboratorní průkaz prionových chorob - limitovaná proteolýza prionového proteinu PrPc.	Prionová choroba ze skupiny transmisivních spongiformních encefalopatií je fatální neurodegenerativní chorobou lidí a zvířat. 1,2 Onemocnění je charakteristické ztrátou neuronů, vytvářením vakuol, reaktivní gliózou a depozicemi abnormálně agregovaného prionového proteinu (PrPSc). Mechanismus rozvoje prionové choroby je konformační změna membránového glykoproteinu neuronů a astrocytů PrPc na PrPSc, který je bohatý na struktury  skládaného listu.2 Zvýšený podíl  struktur provází vytváření agregátů, tzv. amyloidních fibril, rezistentních k proteolytickému štěpení proteinázou K.3 Definitivní diagnóza lidských prionových chorob je založena na neurohistologickém vyšetření doplněném imunohistochemickými metodami a metodou Western blot, které ověřují přítomnost prionů PrPSc. Proteináza K byla pro tento účel kovalentně imobilizována na magnetické latexové mikročástice.4 Připravený magnetický enzymový reaktor byl použit k proteolýze hovězího PrPc připraveného v buněčné kultuře protein vysoce exprimující. Metodou detekce účinnosti štěpení PrPc byl Western blot s imunochemickou detekcí. Výhodou použití magnetických mikro a nanočástic je spojení s mikrofluidní technologií, která za daných podmínek zvyšuje efektivitu proteolýzy.5 Limitovaná proteolýza PrPc v mikrozkumavce a v mikroprůtokovém analyzátoru vykazovala stejný trend proteolýzy, potvrzena byla několikanásobně vyšší účinnost štěpení v mikrofluidním prostředí.
eng	LABORATORY DETECTION OF PRION DISEASE - LIMITED PROTEOLYSIS OF PRION PROTEIN PRPc	Transmissible spongiform encephalopathy or prion disease is fatal neurodegenerative disorders affecting animals and humans.1,2 They are characterized by neuronal cell loss, intense vacuolization, reactive gliosis and deposition of abnormally aggregated prion proteins. The mechanism underlying prion diseases is the conformational conversion of a host-encoded protein, the cellular prion protein (PrPc) to an abnormally folded diseasecausing isoform(PrPSc).3 PrPc glycoprotein mainly in nervous and lymphatic tissues, attached to extracellular side of cytoplasmatic membrane by GPI. Human PrPc high diversity degree to posttranslational changes (hundreds variants), ten genomic variants of PRNP. PrPc neuron and B and T cells surface, alpha helix structure, sensitive to proteolytic digestion, very intensive degradation. PrPSc ?infectious? form, accumulation in cells, non-degradable, aggregating, resistant to proteases (Proteinase K), beta structure.	Proteinase K, limited proteolysis, prion protein

Search

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte