Publikace detail

Kinetics of Hydrolysis of Acetylthiocholine by Cholinesterases.

Autoři: Zdražilová Pavla | Komers Karel | Štěpánková Šárka | Komersová Alena

Rok: 2004

Druh publikace: článek ve sborníku

Název zdroje: European Congress of Young Chemists, Youngchem 2004

Název nakladatele: Warsaw University of Technology

Místo vydání: Varšava

Strana od-do: 111

Tituly:

Jazyk	Název	Abstrakt	Klíčová slova
cze	Kinetika hydrolýzy acetylthiocholinu pomocí cholinesteráz	Alzheimerova choroba (AD)je chronické, nevyléčitelné neurodegenerativní onemocnění. Za jednu z hlavních příčin AD je považován nedostatek acetylcholinu. Tento deficit může být způsoben příliš vysokou koncentrací a/nebo aktivitou enzymů, které acetlcholin rozkládají. Nejúspěšnější terapeutická strategie pro léčbu AD je využití inhibitorů cholinesteráz. Cílem naší práce je najít nová potenciální léčiva AD. Acetylthiocholin (ATCH) je používán pro testování enzynmatické hydrolýzy acetylcholinu in vitro, protože mechanismus hydrolýzy je kvantitativně shodný a rekační průběh hydrolýzy ATCH může být sledován on-line dvěma nezávislými metodami: spectrofotometrickou (Ellmanova metoda; stanovení produktu reakce thiocholinu) a electrochemickou (pH-statová metoda; stanovení kyseliny octové jako produktu). elamnova metoda byla použita pro testování mechanismu neinhibované enzymatické hydrolýzy ATCH butyrylcholinesterázou (BCHE) a acetylcholinesterázou (ACHE). V těchto experimetnech byla sledována závislost koncentrací TCH v čase při 25 oC a pH 8. Tyto závislosti byly korelovány s validitou rovnice Michaelis-Mentenové. S vysokou pravděpodobností bylo zištěno, že hydrolýza ATCH odpovídá této rovnici s nevratným druhým krokem až do úplného vyčerpání substrátu. Korelace byly prováděny protřednictvím diferenciální a integrální rovnice popisující model michaelis-Mentenové. Stanovovány byly optimální hodnoty Michaelisovy konstanty (KM), maximální rychlost(Vm), kinetické konstanty jednotlivých reakčních kroků a absolutní koncentrace použitého enzymu. Získané výsledky jsou nyní použity pro výzkum inhibovaných hydrolýz ATCH pomocí ACHE a BCHE skupinou nových inhibitorů - karbamátů a karbazátů.	acetylthiocholin, cholinesterázy, hydrolýza
eng	Kinetics of Hydrolysis of Acetylthiocholine by Cholinesterases.	Alzheimer's disease (AD) is a chronic, incurable, neurodegenerative disorder. As one of the most common reason for AD lack of acetylcholine is considered. This deficit can be caused by too high concentration and/or activity of enzymes which breakdown acetylcholine. The most successful therapeutic strategy for AD tratment is application of cholinesterase inhibitors. The ideal goal of our research is to find a new potential drug against the Alzheimer´s disease. Acetylthiocholine (ATCH) is used for testing of enzymatic hydrolysis of acetylcholine (ACH) in vitro, because the mechanism of the hydrolysis is qualitatively similar to ACH and its reaction course can be quantitatively measured on-line by two independent methods: spectrophotometric (the Ellman´s method; determination of product thiocholine) and electrochemical (pH-stat method; determination of the product acetic acid). We used the Ellman´s method for testing the mechanism of noninhibited enzymatic hydrolysis of ATCH by butyrylcholinesterase (BCHE) and acetylcholinesterase (ACHE). In these experiments the dependencies of concentrations of thiocholine vs. time at 25oC and pH 8 were measured. These dependencies were correlated with the validity of the Michaelis-Menten´s equation. It was found that with high probability, that all hydrolyses confirm this equation with the second irreversible step up to the total exhaustion of ATCH substrate. The correlations were made by means of differential and integral kinetic equations describing the given Michaelis-Menten model. In every experiment there were calculated optimal values of the Michaelis constant (KM), the maximum velocity (Vm), kinetic constants of single reaction steps and the absolute concentration of the used enzyme. The obtained results are now used in the research of inhibition of enzymatic hydrolyses of ATCH and ACH by BCHE and ACHE with a group of new inhibitors ? carbamates and carbazates.	hydrolysis, acetylthiocholine, cholinesterases

Search

Přihlášení pro studenty

Přihlášení pro zaměstnance

Publikace detail

Katedry

Ústavy a pracoviště

Jak nás najdete?

Služby

Často hledáte